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使用动物体内DNA转染试剂Entranster-in vivo DNA，可便捷完成DNA体内转染操作，进而实现基因过表达、蛋白功能测定等实验，仅需3天即可得出实验结果。以下以“12.5μg核酸+25μl转染试剂、总注射体积100μl、20g小鼠尾静脉注射”为标准示例，详细说明实验步骤；若为局部注射，无需稀释处理，直接根据实验需求将核酸与转染试剂混合后即可使用。
一、实验步骤
1. 核酸稀释：取12.5μg核酸，用无内毒素纯水稀释至浓度为1μg/μl（若核酸原液浓度较低，会相应增加最终注射体积）；先加入12.5μl无内毒素纯水，再加入25μl 10%（w/v）葡萄糖溶液，定容至50μl，充分混匀备用。
2. 转染试剂稀释：取25μl Entranster?-in vivo转染试剂，用25μl 10%（w/v）葡萄糖溶液稀释，定容至50μl，充分混匀备用。
3. 转染复合物制备：立即将稀释好的转染试剂缓慢加入至稀释后的核酸溶液中，快速充分混匀，确保二者完全融合。
4. 室温静置：将配制好的转染复合物在室温下静置15分钟，该复合物需即配即用，不可长期存放，避免影响转染效果。
5. 动物注射：按照对应注射方式完成动物注射，具体注意事项见下文说明。
6. 基因表达检测：根据注射方法及靶器官的不同，基因表达最佳检测时间为注射后12-48小时，可在此时间段内进行相关检测。
7. 长期给药方案：单次给药后，最佳检测时间为注射后12-48小时；若需维持长期实验效果，可采用多次注射方式，常规注射频率为每2-3天一次，具体可根据实验需求灵活调整。
二、实验注意事项
1. 尾静脉注射技巧：优先选择小鼠尾部远端1/3处进行静脉注射；若注射时感觉到明显阻力，需立即停止注射，重新寻找合适静脉位置，切勿强力推注，以免药液注入尾部组织导致尾部溃烂；注射完毕后，移去针头并按压针孔10秒以上，防止药液渗漏。
2. 给药剂量调整：0.625mg/kg为起始给药剂量，若动物耐受良好，可按比例增加剂量；若动物出现不耐受反应，可同比例适当减少剂量，确保实验动物安全。
3. 局部注射要求：局部注射时，在动物耐受范围内，应尽可能增加药液注射量，以提升转染效率。
